【新冠专栏】新冠突变蔓延局势下，疫苗开发下一步将走向何方？

10月5日，纽约时报刊发的文章《新冠，正在撤退》写到 “美国新增病例数在9月-10月期间下降了三分之一”。日本共同社，多家印度媒体也报道了本国新增病例正呈放缓趋势。有专家乐观的表示：“得益于新冠疫苗的持续接种，疫情最严重的阶段已经过去”。然而，就在人们觉得似乎可以松一口气的时候，世卫组织总干事谭德塞在11月4日的新冠肺炎例行发布会上表示“近期新冠疫情加速蔓延，新冠肺炎新增确诊病例和死亡病例再次增加，有56个国家的新增死亡病例数量增加了10%以上。”

疫情的再次起伏，表现出了新冠大流行的发展存在高度不确定性。其主要原因之一是不断涌现的新冠突变毒株往往拥有更强的传染能力和免疫逃逸能力。特别是首次发现于印度的Delta变异毒株(B.1.617.2)，其传播能力强、载毒量高、潜伏期短，已经在超过130个国家传播蔓延。据报道，目前美国、德国和印尼等地传播的新冠毒株几乎100%都是Delta毒株。此外，越来越多的研究表明突变株的流行与突破性感染病例高度相关，据美国疾病控制和预防中心(CDC)所属研究团队发表的研究表明，随着Delta毒株逐渐成为了主流的毒株，完全接种疫苗的医护人员的疫苗有效性在2020年12月至2021年8月14日期间从91%降至了66%。

尽管如此，坚持推广接种疫苗仍然是当下疫情防控的必要措施。因此，为了应对不断涌现的新冠突变株对于疫苗效果可能造成的不利影响，尽可能保证突变蔓延局势下疫苗接种的预防效果，对现有疫苗针对新冠变异毒株的有效性进行检测，同时开发针对突变株的新一代疫苗势在必行。目前，国内外各大疫苗研发及生产企业都在全力开发和评估针对新冠突变株的新一代疫苗。美国Moderna公司开发的针对Beta突变株的mRNA-1273.351和针对Delta突变株的mRNA-1273.617已提交监管审批；国药中生也及时应对，开发了针对Beta和Delta变异毒株的新冠疫苗，目前已提交临床审批。

为了支持新冠疫苗的开发，国家药品监督管理局药品审评中心于2020年8月颁布了《新型冠状病毒预防用疫苗研发技术指导原则（试行）》，对疫苗开发过程进行了指导规范，该原则中表明：

可见，在临床前研究及临床实验过程中，新冠疫苗研发都需要建立对新冠病毒中和能力的检测，同时建议疫苗生产及研发企业在研发早期尽可能建立相关检测方法，积累产品开发各阶段的多批次数据。

检测中和抗体的常见方法主要是病毒中和试验(VNT)，包括蚀斑减少中和试验(PRNT)和细胞病变效应试验(CPE)。尽管这两种方法可靠性高，但需要在高等级生物安全实验室中使用活病毒株进行操作，对试验场地和试验操作有极高要求，并且检验周期长，在实际检测中无法广泛应用。此外，新冠病毒的不断变异更使得病毒中和实验的开展难度再次升级。酶联免疫吸附测定法(ELISA)，利用抗体与抗原之间的特异结合后，利用酶标记的抗体或抗原与之孵育使其发生颜色反应，从而实现定性或定量测定，可作为疫苗研发及质量控制过程中高通量中和抗体检测方法的补充。

常见中和抗体检测方法对比

为助力针对突变株的新冠疫苗的开发，满足疫苗研发及质控环节高效便捷中和抗体检测需求，ACROBiosystems自主研发了系列新型冠状病毒中和抗体检测试剂盒，可作为病毒中和试验(VNT)的高效替代方案，用于临床研究中检测人血清中中和抗体含量，是提高疫苗开发效率、降低开发成本的可靠工具。

试剂盒应用竞争ELISA方法。样本中的中和抗体与微孔板上固定的Human ACE2蛋白特异性竞争HRP标记的SARS-CoV-2 Spike RBD。在450nm、630nm处测定样本吸光度值(OD值)，样本OD值与样本中中和抗体的含量呈负相关。

经验证，上述ELISA试剂盒与假病毒检测结果相关性好，可作为假病毒中和活性检测的高通量替代方法。

利用RAS-N022试剂盒与假病毒 实验对16例康复病人的血清进行中和抗体检测。数据显示，两者具有很高的相关性(R2 =93.73)。

使用上述试剂盒检测56例接种新冠灭活疫苗后血清对野生型及VOCs突变株抗原中和能力，结果表明，受试血清样本对野生型、Alpha、Delta中和能力接近，但对Beta和Gamma毒株的中和能力明显下降。

使用新型冠状病毒中和抗体滴度检测试剂盒对56份灭活疫苗接种后血清样本中和抗体滴度检测。包含WT-RBD(Cat.No.RAS-N022)、B.1.1.7 RBD(Cat.No.RAS-N028)、B.1.351 RBD(Cat.No.RAS-N031)、P.1 RBD(Cat.No.RAS-N034)、B.1.617.2 RBD(Cat.No.RAS-N40)，B.1.617.2 S trimer(Cat.No.RAS-N041）。