膜杰作
Star Staining
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技术沙龙|从抗体设计到高表达细胞株筛选
会议时间：
2019年12月14日-2019年12月14日
主办单位：
生物蜂
主题介绍：
随着近些年免疫治疗的发展,治疗性抗体以其自身特异性和免疫原性小等特点,已成为多种疾病包括癌症、感染、自身免疫性疾病、心血管和神经系统疾病的前沿治疗药物。它被不断应用于新发现的生物靶点，并以多种形式存在，是目前最有前景的一类药物技术。近几年，平均每年有15 种以上抗体新药通过FDA批准，全球生物抗体药销售额已超过每年1800亿美元。
在抗体药物生产中，上游抗体的设计，表达载体的构建过程尤为重要，关系到整个抗体药物的质量及药效。我们将从抗体药物工业生产中抗体的设计、表达载体的构建、转染方法、细胞筛选技术以及稳定细胞株的标准等进行一些探讨。
会议日程：
讨论议题
一、抗体分子设计
1. 抗体分子的不同存在形式以及各自特点，如何选择？
2. 如何针对抗体分子的一些改造设计以增强其结合活性，提高半衰期，增强稳定性，改善聚集倾向等？
3. 成药性评价如何进行，不同IgG形式考虑点在哪里？
二、载体构建
1. 目前构建表达载体的一些策略有单顺反子载体，多启动子表达载体，利用IRES和 Furin-2A介导的三顺反子载体，这些表达载体自身的优缺点？
2. 筛选标记如何考虑，GS？DHFR？还是抗生素标记？
3. 启动子、密码子如何优化
4. 信号肽如何选择
5. 单个载体还是两个载体选择，如何考虑？目前应用最广泛的表达载体形式？
三、细胞转染
1.不同情况下宿主细胞的选择？DG44、CHO-S、CHO-K1？
2. 不同转染方式如脂质体和电转的差异与选择
3. 应用于载体转染时一些提高抗体表达量的策略？
4. 筛选压力如何进行？
四、高产细胞株筛选
1. 目前应用最广泛的高产细胞株筛选方式，高通量筛选模式？筛选方法有哪些最新进展？
2. Beacon光导法仪器高通量筛选单克隆，如何考虑？
3. 应用于高产细胞株筛选的一些策略
4. 4-6个月筛选出4-6 g/L以上单克隆，目前CRO有报道2.5个月得到4-6 g/L以上单克隆，大家如何看待？
5. 细胞株稳定性评价如何考虑？
6. 细胞株构建过程中，克隆源性如何考虑？法规为何如此强调单克隆源性的问题？
7. 定点整合技术如何看待？以后发展趋势如何？
8. CHO细胞是否有可能被其他宿主细胞替代？
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