【前沿进展】【双抗大有可为】再生元研究团队揭示：与CD3的结合亲和力，于TSAxCD3双抗的意义

 研究团队开发了一系列与CD3亲和力不同的双抗，与Jurkat、Human T细胞、Cyno T细胞进行亲和力结合检测验证，中等结合CD3^M、弱结合CD3^W、非常弱结合CD3^VW与T细胞结合依次减弱，CD3^M、CD3^W主要依赖于单价结合， CD3^VW因为亲和力太弱SPR无法检测，依赖于双价结合。对靶抗原的分析显示，不同亲和力CD3双抗对同一靶抗原具有相同亲和力，且无脱靶结合。

CD3亲和性驱动CD3双抗的溶酶体/晚期核内体积累水平。肽接头裂解的程度与CD3臂的亲和性相关，CD3的亲和性越高，则越容易向晚期的核内体/溶酶体间室转移。因为不管结合哪个靶抗原，在CD3^M组观察到高水平肽接头裂解，说明CD3双抗一结合细胞，就会内化被运输到含组织蛋白酶B的细胞内，CD3的亲和性越强，内化程度越高。

CD3双抗的肿瘤细胞的结合能力和的效力之间的相关性依赖于CD3的亲和性。利用不同靶抗原构建的CD3双抗进行体外T细胞激活实验，结果显示CD3亲和力较高的双抗具有较高的T细胞激活信号，EC50值较低。

CD3双抗的生物分布同样受其与CD3的亲和性驱动。体内分布研究显示，CD3^M组双抗主要分布与脾脏和肿瘤区域，CD3^W组双抗主要分布在肿瘤区域，通过加入抗原阻断抗体和CD3阻断抗体，结果同样说明拥有较低亲和力的CD3双抗主要分布肿瘤区域。

与中等亲和力CD3双抗相比，弱亲和力CD3双抗的相对暴露更高，半衰期更长，细胞因子释放水平更低，表明其与CD3的亲和力较低，导致更有利的动力学。

CD3全系列靶点蛋白：CD3E（CD3ε）、CD3D (CD3δ)、CD3G(CD3γ)、CD3E&CD3D (CD3ε& CD3δ）、CD3E&CD3G (CD3ε& CD3γ)

CD3E&CD3D、 CD3E&CD3G，经非还原电泳和MALS技术严格确认为1:1异源二聚体。如：CD3E&CD3D（Cat. No.  CDD-H52Wa)的验证结果。

经与OKT3、SP34-2、UCHT1等热门抗体的结合验证完全符合药物开发要求，可加速抗体药物的开发进程。如：CD3E&CD3D (Cat. No. CDD-H5255) ELISA验证结果。

经SPR验证，BCMA×CD3 双特异性抗体可以与CD3E&CD3D（Cat. No. CDD-H52W1）异源二聚体特异性结合，亲和力常数为31.8 nM，可应用于亲和力测定和抗体药物鉴定。