【技术干货】选对抗独特型抗体开发策略，抢占PK/ADA assay先机

近二十年来，生物技术药物发展迅猛，如CAR-T、抗体、抗体-药物偶联物等在多种重大疾病治疗研究中发挥了巨大的作用。但这些药物作为一种外源蛋白，注入机体后可能会产生抗药物抗体，降低药效，严重时或可危及生命。因此在生物药开发过程中，免疫原性(ADA)研究和药代动力学（PK）分析至关重要。抗独特型抗体是PK/ADA assay的关键工具试剂，为获得准确有效的生物分析方法，快速推进项目进程，明确抗独特型抗体开发策略尤为关键。本文就不同类型生物药的抗独特型抗体开发策略进行了整理归纳，助力您生物分析方法的成功开发。

经过飞速发展的几十年，单克隆抗体已逐渐从科研工具（试剂）转变为加速多种疾病治疗的生物药。其中，抗独特型抗体的开发是研究其有效性和安全性的重要一环。

双特异性抗体：含有2种特异性抗原结合位点的改造抗体，由于该类药物含有两个不同的可变区，故在进行药代动力学分析时更加复杂。

在双抗药物开发过程中，为更好的评估药物的安全性和有效性，一般建议研究者在进行PK分析时选择针对完整双抗进行抗独特型抗体开发研究。

ADC：一类通过一个化学链接将具有生物活性的小分子药物连接到抗体上的抗体-药物偶联物。由于ADC在结构上的特殊性和复杂性，与传统小分子药物和单抗药物相比，评估ADC药物的PK就需要独特且更加复杂的生物分析检测方案。

ADC的PK分析通常要检测其三个关键组分：总抗体，总ADC药物，以及游离的小分子细胞毒性药物（free drug；含/不含linker）。对于ADC以及总抗体，研究者一般使用配体结合试验（Ligand-binding assay，LBA）进行定量分析，依此评估ADC的有效性和靶向毒性。而对于ADC的安全性和稳定性评估，即此类药物在体内对于非肿瘤细胞的毒性，则需对游离的小分子毒性药物也进行定量分析。

CAR-T：嵌合抗原受体T细胞免疫疗法。嵌合抗原受体T细胞(CAR-T细胞)是将能识别某种肿瘤抗原的抗体的抗原结合部与CD3-ζ链或FcεRIγ的胞内部分在体外偶联为一个嵌合蛋白,通过基因转导的方法转染患者的T细胞,使其表达嵌合抗原受体(CAR)。对于CAR-T 一般采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qPCR)和流式细胞术进行PK分析，分别测定外源基因拷贝和CAR+细胞数量的变化。一般采用基于Cell-based  Assay 筛选针对基因工程改造的scFv 抗体的阻断型抗独特型抗体用于CAR-T的PK分析。