流感病毒表面糖蛋白血凝素（HA，hemagglutinin）主要负责病毒与宿主细胞表面的受体结合，使病毒进入宿主细胞并引发感染，是流感疫苗研发中的主要靶标之一。天然HA以三聚体的形式存在于流感病毒包膜表面。在设计基于HA靶标的流感疫苗时，通常会倾向选择天然三聚体结构以更好地模拟病毒的天然状态，从而提高免疫系统的识别能力。除此之外，基于HA三聚体结构设计的多价疫苗可进一步增强流感疫苗的效力和广谱性，是当前流感疫苗研究的一个重要方向。
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• 结构决定功能
研究表明，流感HA三聚体的结构对其功能有关键影响。三聚体结构的HA能够与宿主细胞表面的受体结合，介导病毒的侵入。此外HA三聚体在免疫系统中能够有效诱导抗体反应，尤其是对于流感病毒的保护性抗体。
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• 三聚体结构疫苗具有更高的免疫原性
一项发表在《Vaccine》杂志上的研究探讨了使用流感HA三聚体的疫苗在老年人群中的免疫原性。研究表明，与传统的单体HA疫苗相比，三聚体结构的HA能够更有效地激活老年人的免疫系统，产生更高水平的中和抗体，提高了疫苗的保护效果。
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• 多价疫苗设计
流感HA三聚体的结构也为设计多价疫苗提供了理论基础。研究者已经探索了包含多种流感HA亚型的三聚体疫苗的潜力。这些疫苗可以覆盖多种流感病毒的变异，并在预防流感流行中具有广泛的应用前景。
在疫苗的开发和生产过程中，活性成分的检测以及疫苗效价评估往往是人们关注的重点。抗原和抗体原料需要符合特定的要求才能更好的辅助流感疫苗的研发。对于流感HA蛋白，人们更关注其天然三聚体结构和血凝活性，而抗HA抗体更关注其亚型和菌株的特异性。ACROBiosystems百普赛斯开发的流感HA蛋白维持了三聚体结构，可以确保其生物活性与天然三聚体HA蛋白相似。利用高活性三聚体HA蛋白及其筛选的特异性抗体作为建立流感疫苗开发方法的关键原料，帮您更准确、更有效地支持流感疫苗的开发！
利用SEC-MALS表征HA三聚体及HA单体结构差异
Table 1. Molecular Analysis Results of Monomer and Trimer HA Protein.
Figure 1. Chromatogram collected through SEC-MALS using standard solutions of HA proteins. Retention time (RT) information is collected from UV detector, while molecular weight (MW) is collected from MALS.
天然三聚体HA蛋白的结构决定了其功能活性。ACROBiosystems采用ELISA和血凝实验分别观察验证构象变化及活性差异。间接ELISA结果表明，天然三聚体HA蛋白的活性优于HA单体。
Figure 2. Comparison of activity of trimer HA protein and monomer HA protein.
流感病毒颗粒表面的HA蛋白能够与禽类和哺乳动物红细胞上的含n-乙酰神经氨酸的蛋白结合。当结合时，会发生凝集反应，红细胞连接在一起形成一个弥散晶格。具有天然三聚体结构的HA蛋白可以与禽类和哺乳动物的红细胞结合产生凝集反应。在红细胞血凝试验中，天然三聚体HA蛋白表现出良好的血凝活性。
Figure 3. Influenza B virus [Austria/1359417/2021 (B/Victoria lineage)] Hemagglutinin (HA) Protein, His Tag (Cat. No. HAE-V52H8) binding to RBCs (Rooster red blood cells) at a final concentration of 0.4688 μg/mL can lead to complete hemagglutination. The final concentration of the sample in the first well was 15 μg/mL.
三聚体HA蛋白的重组表达模拟了流感病毒颗粒表面HA蛋白的结构，用其免疫和筛选抗体，可以获得能够识别天然三聚体HA蛋白的亚型及毒株特异性抗体。从而更好的助力流感疫苗抗原定量检测方法的开发。
Table 2. Cross-reactivity of HA antibodies against HA proteins of varying influenza strains by ELISA (partial display).
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