Vero细胞在疫苗生产中的应用与残留DNA控制

Vero细胞源自非洲绿猴的肾脏上皮细胞，因其独特的生物学特性，广泛应用于病毒疫苗的生产。首先，Vero细胞首要显著优势是其培养的简便性和稳定性。Vero细胞易于建立细胞库、培养和冻存，且具有较强的细胞贴壁性。其次，Vero细胞能够在常见培养基中快速生长并稳定传代，遗传背景稳定，一定的传代次数内无致癌风险，且在传代过程中保持主要生物学特性和功能的一致性。此外，Vero细胞12号染色体部份缺失，具有干扰素分泌缺陷的特点，导致其在受到病毒感染时无法分泌干扰素。由于这一缺陷，Vero细胞在疫苗生产过程中为病毒提供了一个相对“宽松”的环境，从而促进病毒的快速繁殖，可产生较高的病毒滴度。因此Vero细胞成为全球疫苗产业的核心，一直广泛应用在各种疫苗生产工艺中。

由于Vero细胞在疫苗生产中的独特优势，目前广泛支持乙型脑炎、脊髓灰质炎、狂犬病、黄热病、新冠病毒等多种病毒的培养。现在Vero细胞已建立现代化疫苗生产标准流程，特别是在自动化生产和大规模生产方面进行了优化。较强的细胞贴壁性的特点使Vero细胞能够在微载体表面生长，并能够适应先进的微载体生物反应器工艺。这种特性有利于大规模自动化生产，显著提高了生产效率，同时大幅降低了生产成本。基于这些优点，Vero细胞已获得全球多个国家和地区，包括WHO和中国在内的60多个监管机构的认可，成为疫苗生产的主流平台, 其相关的宿主细胞DNA检测法规也应运而生。

尽管Vero细胞在疫苗生产中具有明显优势，但宿主细胞DNA（Host Cell DNA，HCD）残留问题仍需重视。Vero细胞DNA残留可能被人体免疫系统识别为外来物质，进而引发过敏反应、炎症等不良反应，严重情况下，甚至可能带来潜在的致癌风险。因此，确保不同批次疫苗中的Vero HCD残留量符合国际及各国药品监管标准至关重要。全球各大药品监管机构，包括世界卫生组织（WHO）和中国药监局，都对Vero细胞的DNA残留量提出了严格要求。例如，中国药典对以Vero细胞为基础生产的疫苗DNA残留量规定明确，冻干乙型脑炎疫苗的DNA残留量不得超过100pg/剂，Sabin株脊髓灰质炎疫苗不应超过50pg/剂，而人用狂犬病疫苗的宿主DNA残留量为≤3ng/剂。各国药品监管部门通过严格控制Vero细胞DNA残留，以确保疫苗质量与安全，减少因DNA残留引发的不良反应风险。

检测宿主细胞DNA残留通常采用高灵敏度的定量PCR技术，能够准确检测到即便是微量的DNA残留。因此，Vero残留DNA定量试剂盒（qPCR）已成为全球疫苗生产中不可或缺的质量控制工具。通过DNA定量试剂盒在疫苗生产的每个环节中进行DNA残留检测，生产企业能够从源头上控制疫苗质量，确保每一批疫苗都符合国际安全标准。这样，不仅能够有效预防相关不良反应，还能提高疫苗的市场认可度，从而促进全球公共卫生事业的健康发展。

• 标准品可溯源，与国际标准品对标

将300pg，3pg，0.3pg的Vero残留DNA定量试剂盒（货号OPA-R018）标准品作为待测样本，以Vero残留DNA定量试剂盒标准品、中检院标准品、USP标准品分别制作标曲进行回收率对比验证，数据显示回收率均在标准范围内（80%-120%）。Vero残留DNA定量试剂盒（qPCR）标准品、中检院标准品、USP标准品具有可比性。

• 高灵敏度

使用Vero残留宿主DNA定量试剂盒实现的高灵敏度和宽动态范围。（A）采用标准品 1（30 pg/μL）至标准品 5（3 fg/μL）所获得的典型分析结果。（B）10 倍稀释系列的标准曲线。聚合酶链式反应（PCR）效率应介于 90% - 110% 之间。

• 高特异性

存在大肠杆菌 DNA、中国仓鼠卵巢（CHO）细胞 DNA 和毕赤酵母（Pichia）DNA 的情况下使用Vero残留宿主DNA定量试剂盒进行 10 倍连续稀释后生成的标准曲线，结果显示不具有干扰。